Оценка состояния клеточного и гуморального звеньев иммунитета в сторожевом лимфатическом узле при раке молочной железы

Введение. Морфофункциональный статус сторожевого лимфатического узла (СЛУ) является прогностическим фактором метастазирования опухоли. Согласно современным представлениям лимфогенное метастазирование опухоли наиболее высоко в СЛУ, а при отсутствии в нем метастазов высока вероятность отсутствия метастазов в других лимфатических узлах. В эпоху разработки новых иммунных методов лечения рака молочной железы важной задачей становится определение биомаркеров, которые могут предсказать статус лимфатических узлов.

Цель исследования – изучить клиническую значимость относительного содержания CD3+, CD20+-клеток в сторожевых лимфатических узлах при раке молочной железы при отсутствии и наличии в них метастазов.

Материалы и методы. При помощи иммуногистохимического метода изучены СЛУ без метастазов и с метастазами, полученные во время операции по поводу рака молочной железы у 18 пациентов.

Результаты. Сравнительный морфологический анализ выявил, что число CD3- и СD20-иммунопозитивных клеток было значительно выше в СЛУ без метастазов.

Обсуждение. В противоопухолевом иммунном ответе принимают участие гуморальная и клеточная системы иммунитета. Контроль над ростом опухоли осуществляют в основном Т-клетки. Результаты проведенного нами исследования показали сравнительно высокии их уровень в СЛУ без метастатического поражения. Сведения же о противоопухолевои активности B-лимфоцитов противоречивы, показана как положительная, так и отрицательная роль В-клеток в противоопухолевом иммунитете. Результаты исследовании показали, что в СЛУ с вторичными очагами опухолевого роста число CD20+ B клеток значительно ниже, что указывает на важную роль гуморального иммунитета в дополнение к клеточно-опосредованному иммунитету при раке молочнои железы.

Заключение. Количественная оценка (CD3+CD20)-клеток в СЛУ может быть использована в качестве возможного прогностического маркера при метастазировании опухоли молочной железы. 

1. Ganaraj A., Kuhn J.A., Jones R.C. et al. Predictors for nonsentinel node involvement in breast cancer patients with micrometastases in the sentinel lymph node. Proc (Bayl Univ Med Cent). 2003;16(1):3–6. https://doi.org/10.1080/08998280.2003.11927881.

2. Herrero M., Ciérvide R., Calle-Purón M.E. et al. Macrometastasis at selective lymph node biopsy: A practical going-forthe-one clinical scoring system to personalize decision making. World J Clin Oncol. 2021;12(8):675–687. https://doi.org/10.5306/wjco.v12.i8.675.

3. Wang G., Zhang S., Wang M. et al. Prognostic significance of occult lymph node metastases in breast cancer: a meta-analysis. BMC Cancer. 2021;21(1):875. https://doi.org/10.1186/s12885-021-08582-1.

4. Houvenaeghel G., de Nonneville A., Cohen M. et al. Lack of prognostic impact of sentinel node micro-metastases in endocrine receptor-positive early breast cancer: results from a large multicenter cohort. ESMO Open. 2021;6(3):100151. https://doi.org/10.1016/j.esmoop.2021.100151.

5. Apple S.K. Sentinel Lymph Node in Breast Cancer: Review Article from a Pathologist’s Point of View. J Pathol Transl Med. 2016;50(2):83–95. https://doi.org/10.4132/jptm.2015.11.23.

6. Антонова И.Б., Алешикова О.И., Ригер А.Н., Мамурова Г.А. Диагностическая значимость лимфаденэктомии и биопсии сторожевого лимфоузла у пациенток с I и II стадиеи рака тела матки. Доктор.Ру. 2021;20(8):59–63. https://doi.org/10.31550/1727-2378-2021-20-8-59-63.

7. Зикиряходжаев А.Д., Грушина Т.И., Старкова М.В. с соавт. Методы диагностики сторожевого лимфатического узла у больных раком молочнои железы. Сибирскии онкологическии журнал. 2020;19(5):88–96. https://doi.org/10.21294/1814-4861-2020-19-5-88-96.

8. Семиглазов В.Ф., Криворотько П.В., Жильцова Е.К. с соавт. Двадцатилетнии опыт изучения биопсии сигнальных лимфатических узлов при раке молочнои железы. Опухоли женскои репродуктивнои системы. 2020;16(1):12–20.

9. Старкова М.В., Зикиряходжаев А.Д., Грушина Т.И. с соавт. Диагностическая значимость биопсии сторожевого лимфатического узла у больных ранним раком молочнои железы. Онкология. Журнал им. П.А. Герцена. 2019;8(6):422–427.

10. Ermakov A.V., Zikiryahodzhaev A.D., Saribekyan E.K. et al. The biological conceptualization of the sentinel lymph node. Malignant Tumours. 2016;4:5–13. https://doi.org/10.18027/2224–5057–2016–4–5–13.

11. Maguire A., Brogi E. Sentinel Lymph Nodes for Breast Carcinoma: A Paradigm Shift. Arch Pathol Lab Med. 2016;140(8):791–798. https://doi.org/10.5858/arpa.2015-0140-RA.

12. Faries M.B., Morton D.L. Chapter 5. The clinical significance of lymph node metastasis. Lymphangiogenesis in Cancer Metastasis. Stacker SA, Achen MG (eds.). ©Springer Science+Business Media B.V. 2009;83–118.

13. Mascarel I., MacGrogan G., Picot V., Mathoulin-Pelissier S. Prognostic significance of immunohistochemically detected breast cancer node metastases in 218 patients. Br J Cancer. 2002;87(1):70–74. https://doi.org/10.1038/sj.bjc.6600420.

14. Мельников В.Л., Митрофанова Н.Н., Мельников Л.В. Противоопухолевыи иммунитет: учеб. пособие. Пенза: Издво ПГУ, 2015. 84 с.

15. Шубина И.Ж., Сергеев А.В., Мамедова Л.Т. с соавт. Современные представления о противоопухолевом иммунитете. России скии биотерапевтическии журнал. 2015;14(3):19–28. https://doi.org/10.17650/1726-9784-2015-14-3-19-28.

16. Berghoff A.S., Fuchs E., Ricken G. et al. Density of tumor-infiltrating lymphocytes correlates with extent of brain edema and overall survival time in patients with brain metastases. Oncoimmunology. 2016;5:e1057388. https://doi.org/10.1080/2162402x.2015.1057388.

17. Bremnes R.M., Busund L.T., Kilvaer T.L. et al. The Role of Tumor-Infiltrating Lymphocytes in Development, Progression, and Prognosis of Non-Small Cell Lung Cancer. J Thorac Oncol. 2016;11:789–800. https://doi.org/10.1016/j.jtho.2016.01.015.

18. Burugu S., Asleh-Aburaya K., Nielsen T.O. Immune infiltrates in the breast cancer microenvironment: detection, characterization and clinical implication. Breast Cancer. 2017;24(1):3–15. https://doi.org/10.1007/s12282-016-0698-z.

19. Nguyen N., Bellile E., Thomas D. et al. Tumor infiltrating lymphocytes and survival in patients with head and neck squamous cell carcinoma. Head Neck. 2016;38:1074–1084. https://doi.org/10.1002/hed.24406.

20. Zeng D.Q., Yu Y.F., Ou Q.Y. et al. Prognostic and predictive value of tumor-infiltrating lymphocytes for clinical therapeutic research in patients with non-small cell lung cancer. Oncotarget. 2016;7:13765–13781. https://doi.org/10.18632/oncotarget.7282.

21. Zikich D., Schachter J., Besser M.J. Predictors of tumor-infiltrating lymphocyte efficacy in melanoma. Immunotherapy. 2016;8:35–43. https://doi.org/10.2217/imt.15.99.

22. Aasebø K., Bruun J., Bergsland C.H. et al. Prognostic role of tumour-infiltrating lymphocytes and macrophages in relation to MSI, CDX2 and BRAF status: a population-based study of metastatic colorectal cancer patients. Br J Cancer. 2022;126(1):48– 56. https://doi.org/10.1038/s41416-021-01586-5.

23. Chen D.S., Mellman I. Elements of cancer immunity and the cancer-immune set point. Nature. 2017;541(7637):321–330. https://doi.org/10.1038/nature21349.

24. Schalper K.A., Brown .J, Carvajal-Hausdorf D. et al. Objective measurement and clinical significance of TILs in non-small cell lung cancer. J Natl Cancer Inst. 2015;107(3). https://doi.org/10.1093/jnci/dju435.

25. Kayser G., Schulte-Uentrop L., Sienel W. et al. Stromal CD4/CD25 positive T-cells are a strong and independent prognostic factor in non-small cell lung cancer patients, especially with adenocarcinomas. Lung Cancer. 2012;76(3):445–451. https://doi.org/10.1016/j.lungcan.2012.01.004.

26. Donnem T., Hald S.M., Paulsen E.E. et al. Stromal CD8+ T-cell density-a promising supplement to TNM staging in non-small cell lung cancer. Clin Cancer Res. 2015;21(11):2635–2643. https://doi.org/10.1158/1078-0432.CCR-14-1905.

27. Zou W., Zhou M.L., Zhang L.Y. et al. Immune Score Predicts Outcomes of Gastric Cancer Patients Treated with Adjuvant Chemoradiotherapy. J Oncol. 2021;9344124. https://doi.org/10.1155/2021/9344124.

28. Barbosa A.M., Martinho O., Nogueira R. et al. Increased CD3+, CD8+, or FoxP3+ T Lymphocyte Infiltrations Are Associated with the Pathogenesis of Colorectal Cancer but Not with the Overall Survival of Patients. Biology (Basel). 2021;10(8):808. https://doi.org/10.3390/biology10080808.

29. Стенина М.Б., Царева Е.В., Жаров А.А. с соавт. Инфильтрирующие опухоль лимфоциты: биологическая суть и клиническое значение при раке молочнои железы. России скии онкологическии журнал. 2016;1–2:92–100.

30. Abousamra S., Gupta R., Hou L. et al. Deep Learning-Based Mapping of Tumor Infiltrating Lymphocytes in Whole Slide Images of 23 Types of Cancer. Front Oncol. 2022;11:806603.

31. Eiró N., Pidal I., Fernandez-Garcia B. et al. Impact of CD68/(CD3+CD20) ratio at the invasive front of primary tumors on distant metastasis development in breast cancer. PLoS One. 2012;7(12):e52796. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0052796.

32. Van Berckelaer C., Vermeiren I., Vercauteren L. et al. The Evolution and Prognostic Role of Tumour-Infiltrating Lymphocytes and Peripheral Blood-Based Biomarkers in Inflammatory Breast Cancer Patients Treated with Neoadjuvant Chemotherapy. Cancers. 2021;13(18):4656. https://doi.org/10.3390/cancers13184656.

33. König L., Mairinger F.D., Hoffmann O. et al. Dissimilar patterns of tumor-infiltrating immune cells at the invasive tumor front and tumor center are associated with response to neoadjuvant chemotherapy in primary breast cancer. BMC Cancer. 2019;19(1):120. https://doi.org/10.1186/s12885-019-5320-2.

34. Luen S., Salgado R., Fox S.B. et al. Tumour-infiltrating lymphocytes in advanced HER2-positive breast cancer treated with pertuzumab or placebo in addition to trastuzumab and docetaxel: a retrospective analysis of the CLEOPATRA study. Lancet Oncology. 2017;18:52–62.

35. Волченко Н.Н., Борисова О.В., Мельникова В.Ю. с соавт. Срочное интраоперационное цитологическое исследование сторожевых лимфатических узлов при раннем раке молочнои железы. Онкология. Журнал им. П.А. Герцена. 2019;8(3):169–174. https://doi.org/10.17116/onkolog20198031169.

36. Старкова М.В., Зикиряходжаев А.Д., Грушина Т.И. с соавт. Диагностическая значимость биопсии сторожевого лимфатического узла у больных ранним раком молочнои железы. Онкология. Журнал им. П.А. Герцена. 2019;8(6):422– 427. https://doi.org/10.17116/onkolog20198061422.

37. Цыплаков Д.Э., Бажанов А.Б. Морфометрическое и иммуногистохимическое исследование регионарных лимфатических узлов при раке желудка. Казанскии медицинскии журнал. 2015;96(6):971–978. https://doi.org/10.17750/KMJ2015-971.

38. Ermakov A.V., Saribekyan E.K., Ablitsova N.V., Usov F.N. Sentinel lymph nodes in malignant tumors. Malignant Tumours. 2017;1:70–77. https://doi.org/10.18027/2224-5057-2017-1-70-77.

39. Шарафутдинова Л.А. Морфофункциональные изменения нервнои , иммуннои и репродуктивнои систем при воздеи ствии наноразмерного диоксида титана в форме рутила: дис. ... докт. биол. наук. Казань, 2019. 258 с.

40. Ганцев Ш.Х., Рустамханов Р.А., Кзыргалин Ш.Р., Турсуметов Д.С. Неолимфогенез и иммуногистохимическое исследование лимфатических узлов при раке молочнои железы. Креативная хирургия и онкология. 2019;9(4):266–272.

41. Kwak Y., Koh J., Kim D.W. et al. Immunoscore encompassing CD3+ and CD8+ T cell densities in distant metastasis is a robust prognostic marker for advanced colorectal cancer. Oncotarget. 2016;7(49):81778–81790. https://doi.org/10.18632/oncotarget.13207.

42. Gabrielson A., Wu Y., Wang H. et al. Intratumoral CD3 and CD8 T-cell Densities Associated with Relapse-Free Survival in HCC. Cancer Immunol Res. 2016;4:419–430. https://doi.org/10.1158/2326-6066.cir-15-0110.

43. Salgado R., Denkert C., Demaria S. et al. The evaluation of tumor-infiltrating lymphocytes (TILs) in breast cancer: recommendations by an International TILs Working Group 2014. Ann Oncol. 2015;26:259–271. https://doi.org/10.1093/annonc/mdu450.

44. Topalian S.L., Taube J.M., Anders R.A., Pardoll D.M. Mechanism-driven biomarkers to guide immune checkpoint blockade in cancer therapy. Nat Rev Cancer. 2016;16(5):275–278. https://doi.org/10.1038/nrc.2016.36.

45. Lee W.S., Park S., Lee W.Y. et al. Clinical impact of tumor-infiltrating lymphocytes for survival in stage II colon cancer. Cancer. 2010;116:5188–99. https://doi.org/10.1002/cncr.25293.

46. Van den Bosch G.A., Ponsaerts P., Nijs G. et al. Ex vivo induction of viral antigen-specific CD8 T cell responses using mRNA-electroporated CD40-activated B cells. Clin Exp Immunol. 2005;139(3):458–467. https://doi.org/10.1111/j.13652249.2005.02733.x.

47. DiLillo D.J., Yanaba K., Tedder T.F. B cells are required for optimal CD4+ and CD8+ T cell tumor immunity: therapeutic B cell depletion enhances B16 melanoma growth in mice. J Immunol. 2010;184(7):4006–4016.

48. Sorrentino R., Morello S., Forte G. et al. B cells contribute to the antitumor activity of CpG-oligodeoxynucleotide in a mouse model of metastatic lung carcinoma. Am J Respir Crit Care Med. 2011;183(10):1369–1379.

49. Taghavi N., Mohsenifar Z., Baghban A.A., Arjomandkhah A. CD20+ Tumor Infiltrating B Lymphocyte in Oral Squamous Cell Carcinoma: Correlation with Clinicopathologic Characteristics and Heat Shock Protein 70 Expression. Patholog Res Int. 2018:4810751. https://doi.org/10.1155/2018/4810751.